毛细管电泳仪的工作原理是什么？毛细管电泳有什么特点？

毛细管电泳仪的工作原理是什么?

毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH>3情况下，其内表面带负电，和溶液接触时形成一双电层。在高电压作用下，双电层中的水合阳离子引起流体整体朝负极方向移动的现象叫电渗。粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致，故最先流出;中性粒子的电泳速度为“零”，故其迁移速度相当于电渗流速度;负离子的运动方向与电渗流方向相反，但因电渗流速度一般都大于电泳流速度，故它将在中性粒子之后流出，从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。

毛细管电泳有什么特点?

毛细管电泳通常使用内径为25-100 μm 的弹性(聚酰亚胺)涂层熔融石英管。标准毛细管的外径为375 μm，有些管的外径为160 μm。毛细管的特点是：容积小(一根100 cm×75 μm 管子的容积仅4.4 μL);侧面/截面积比大，因而散热快、可承受高电场(100-1000 V/cm);可使用自由溶液、凝胶等为支持介质;在溶液介质下能产生平面形状的电渗流。

由此，可使毛细管电泳具备如下优点：

(1)高效塔板数目在105-106 片/m 间，当采用CGE 时，塔板数目可达107 片/m 以上;

(2)快速一般在十几分钟内完成分离;

(3)微量进样所需的样品体积为nL 级;

(4)多模式可根据需要选用不同的分离模式且仅需一台仪器;

(5)经济实验消耗不过几毫升缓冲溶液，维持费用很低;

(6)自动CE 是目前自动化程度较高的分离方法。

毛细管电泳的缺点是：

(1) 由于进样量少，因而制备能力差;

(2) 由于毛细管直径小，使光路太短，用一些检测方法(如紫外吸收光谱法)时，灵敏度较低;

(3)电渗会因样品组成而变化，进而影响分离重现性。